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如何優(yōu)化厭氧培養(yǎng)箱的使用效果

更新時間:2024-11-13      點(diǎn)擊次數(shù):502
   厭氧培養(yǎng)箱是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中的重要設(shè)備,用于在無氧或低氧環(huán)境下進(jìn)行微生物培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)等研究。為了提高其使用效率和培養(yǎng)效果,我們需要關(guān)注多個方面。
 
  一、準(zhǔn)備工作
 
  1.環(huán)境要求:將厭氧培養(yǎng)箱放置在干燥、通風(fēng)良好、無振動的地方,確保氣源和電源連接正常。避免周圍存在易燃易爆物品,以防發(fā)生意外。
 
  2.清潔與消毒:定期使用適當(dāng)?shù)南緞┣鍧嵟囵B(yǎng)箱內(nèi)外表面,特別是操作臺、門把手等高頻接觸區(qū)域。可以使用0.1%苯扎溴銨溶液或2%甲醛液擦拭工作臺面及可能污染的死角,濕拖地面,保持培養(yǎng)箱的清潔衛(wèi)生。
 
  3.檢查設(shè)備狀態(tài):在每次使用前,仔細(xì)檢查儀器的各個部件是否處于良好的工作狀態(tài),包括溫度控制器、傳感器、厭氧氣體入口、排氣閥和觀察窗等。確保設(shè)備各項(xiàng)設(shè)施完備,能夠正常運(yùn)行。
 

 

  二、操作過程
 
  1.形成厭氧環(huán)境:
 
  -根據(jù)使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入無毒塑料袋。
 
  -開啟電源,打開溫度控制器,調(diào)節(jié)至所需的培養(yǎng)溫度。
 
  -向操作室內(nèi)放入鈀粒(封閉)和干燥劑,同時放入美蘭指示劑(封閉),以監(jiān)測厭氧環(huán)境的形成。
 
  -關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,進(jìn)行真空檢查,確保密封性良好。
 
  -進(jìn)行至少三次的氣體置換,第一次和第二次通常使用氮?dú)猓谌问褂没旌蠚怏w(如N2:H2:CO2=85%:10%:5%),以排除操作室內(nèi)的空氣。
 
  2.催化脫氧:打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。一小時后打開美蘭指示劑觀察其變色情況,以確認(rèn)操作室內(nèi)是否達(dá)到厭氧環(huán)境。
 
  3.滅菌處理:開啟紫外線滅菌燈,對室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。滅菌時間根據(jù)實(shí)際情況自定,但應(yīng)確保充分滅菌,以減少微生物污染的風(fēng)險。
 
  4.菌種置入和培養(yǎng):
 
  -檢查并關(guān)閉取樣室的門,確保密封性。
 
  -將菌種放入取樣室后,打開取樣室外門并關(guān)閉外門。取樣室充滿氮?dú)獠⒏鼡Q三次,以確保厭氧條件。
 
  -接種棒滅菌器的應(yīng)用:使用鎳鉻電熱絲使電極短路以致變紅進(jìn)行滅菌。
 
  三、注意事項(xiàng)
 
  1.操作規(guī)范:建立和遵循標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP),確保每次實(shí)驗(yàn)前凈化系統(tǒng)至少運(yùn)轉(zhuǎn)1小時以上,同時開啟凈化臺和紫外燈。嚴(yán)格按照操作流程進(jìn)行實(shí)驗(yàn),避免因操作失誤導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或污染。
 
  2.無菌操作:操作人員在進(jìn)入操作區(qū)域前,應(yīng)穿戴無菌工作服、口罩和手套,確保個人衛(wèi)生。在操作過程中,應(yīng)避免大幅度或快速動作,以免攪動空氣中的塵埃微粒。所有進(jìn)入培養(yǎng)箱的物品必須經(jīng)過嚴(yán)格的表面消毒處理。
 
  3.氣體管理:確保儀器內(nèi)的氣體供應(yīng)穩(wěn)定,及時更換氣體瓶和厭氧指示劑等。在操作過程中,避免在開啟門的情況下進(jìn)行操作,以免破壞厭氧環(huán)境。定期檢查氧氣、氫氣和二氧化碳?xì)怏w濃度,避免漏氣。
 
  4.設(shè)備維護(hù):定期檢查儀器的各個部件,包括溫度控制器、傳感器、厭氧氣體入口、排氣閥和觀察窗等,確保它們處于良好的工作狀態(tài)。及時維修和更換損壞的部件,以保證設(shè)備的正常運(yùn)行。
 
  5.環(huán)境監(jiān)測:定期監(jiān)測操作室內(nèi)的微生物污染情況,包括沉降菌落計數(shù)和浮游菌測定,以確保環(huán)境符合無菌標(biāo)準(zhǔn)。使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基進(jìn)行環(huán)境微生物監(jiān)測,如胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),并在必要時加入中和劑,以避免假陰性結(jié)果。
 
  通過遵循以上步驟和注意事項(xiàng),可以最大限度地提高厭氧培養(yǎng)箱的使用效率和培養(yǎng)效果,為生物學(xué)研究提供可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
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